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分光光度計(jì)的知識(shí)

更新時(shí)間:2016-06-27      點(diǎn)擊次數(shù):1379
分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,它是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)用的常規(guī)儀器。常用于核算、蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。在印染方面,我們可以用分光光度計(jì)測(cè)量染色時(shí)燃料的上染百分率,以及整理在織的衣物上助劑的濃度,還可以用于顏色的測(cè)量。同時(shí)它還廣泛的應(yīng)用于食品檢測(cè)、農(nóng)藥的檢測(cè)以及工業(yè)上石油的檢測(cè)等,紫外可見光光分度在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用非常廣泛。  分光光度計(jì)的組成  各種型號(hào)的可見分光光度計(jì),就其基本結(jié)構(gòu)來(lái)說(shuō),都是由五個(gè)部分組成的,即光源、單色器、洗手池、檢測(cè)器以及信號(hào)指示系統(tǒng)。如圖所示:  光源→單色器→吸收池→檢測(cè)器→信號(hào)顯示系統(tǒng)  分光光度計(jì)的基本原理  基于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的選擇性吸收,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜,當(dāng)光經(jīng)色散后的光譜通過(guò)某一溶液時(shí),其中某些波長(zhǎng)的光就會(huì)被溶液吸收。根據(jù)朗伯-比爾定律,當(dāng)一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時(shí),光強(qiáng)的減小程度和入射光的強(qiáng)度,溶液的濃度以及所透過(guò)溶液的長(zhǎng)度成正比,其公式為:T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc  其中:T:透色比 I0:入射光強(qiáng) A:吸光度 I:頭色光強(qiáng)度 K:吸收系數(shù),1/mol/com b:液層厚,cm C:溶液的濃度,mol/l  光的吸收定律的使用范圍  光的吸收定律不僅適用于有色溶液,也適用于無(wú)色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系,不僅適用于可見光的單色光,也適用于紫外和紅外光區(qū)的單色光,但應(yīng)注意,此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過(guò)大時(shí),透光性質(zhì)發(fā)生變化,從容使溶液對(duì)光的吸收度與溶液濃度不成正比關(guān)系,波長(zhǎng)交寬的混合光影響光的互補(bǔ)吸收,也會(huì)使測(cè)定產(chǎn)生誤差。

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